Pan02: modelo de adenocarcinoma del conducto pancreático caracterizado para aplicaciones de inmuno-oncología

AUTOR:

Dylan Daniel, PhD, Director, Desarrollo Científico

FECHA:

 Julio de 2017

El adenocarcinoma ductal de páncreas (ADP) es la forma de cáncer de páncreas más común y representa alrededor del 95 % de todos los casos. En 2017, se diagnosticará ADP a aproximadamente 50.987 personas en Estados Unidos y morirán aproximadamente 40.936 pacientes, por lo cual se considera que el ADP es una de las formas de cáncer más letales. El tratamiento estándar en EE. UU. es la quimioterapia combinada con taxanos antimetabolitos y antimitóticos, pero históricamente estas opciones de tratamiento solo mejoran la sobrevida total en algunas semanas. Hay una necesidad médica insatisfecha fundamental de enfoques terapéuticos novedosos para tratar el cáncer de páncreas.

Como tantos enfoques novedosos para el tratamiento de cáncer de páncreas han tenido resultados clínicos desalentadores, muchos científicos de descubrimiento de fármacos han recurrido a la inmunoterapia en cáncer de páncreas debido al éxito reciente al aprovechar el sistema inmunológico para tratar otros tipos de cáncer. Si bien hay una cantidad limitada de líneas celulares singeneicas de cáncer de páncreas en ratones, Covance ha caracterizado el modelo Pan02 de ADP para aplicaciones inmuno-oncológicas. El modelo Pan02 se derivó de ratones C57BL/6 a los cuales se administró 3-metilcolantreno ortotópico y es resistente a muchos agentes quimioterapéuticos estándar.1 El Pan02 contiene una mutación de pérdida de función en el gen SMAD4 que es funcionalmente similar a las mutaciones inactivadoras en aproximadamente el 30 % de los cánceres pancreáticos humanos.2

 

Curvas de crecimiento promedio e individual

Covance mantiene el Pan02 como modelo de fragmento transportable y se ilustran el promedio de cinética de crecimiento (figura 1A) y las curvas de crecimiento en animales individuales (figura 1B). El Pan02 tiene un tiempo de duplicación tumoral de seis días, que es más lento que la mayoría de los tumores de líneas celulares de ratones singeneicos. Este crecimiento más lento puede hacer que sea más tratable a través de la inmunoterapia, ya que hay tiempo para que las terapias modifiquen el sistema inmunológico y produzcan actividad antitumoral antes de que los tumores alcancen los criterios de eutanasia.

Fig. 1 (A y B): crecimiento del cáncer pancreático Pan02 en ratones C57BL/6
Fig. 1 (A y B): crecimiento del cáncer pancreático Pan02 en ratones C57BL/6

 

Tasas de eficacia y sobrevida con anti-PD-1 y anti-CTLA-4

Actualmente, los anticuerpos inhibidores de puntos de control de células T contra el CTLA-4, PD-1, y PD-L1 están aprobados en casos de cáncer no pancreático. Probamos el anti-CTLA-4 (clon 4F10) y anti-PD-1 (clon RMP1-14), por separado y en combinación, en el modelo Pan02. Se inició la dosificación tres días después del implante y el promedio de carga tumoral grupal no ilustra una actividad significativa en ninguno de los grupos 2A). A menudo sucede que las inmunoterapias presentan actividad únicamente en un subgrupo de animales en tratamiento; por lo tanto, los gráficos de animales individuales son valiosos para detectar esas respuestas. Sin embargo, los gráficos de animales individuales no presentan ninguna actividad significativa con los agentes de prueba que no se observe también en el grupo de control (figura 2B). Además, tal como se esperaba por los datos de respuesta en el crecimiento, no hay mejoras en la sobrevida de los grupos en tratamiento en comparación con los grupos de control (figura 3).

  

Fig. 2A: eficacia del anti-PD-1 y anti-CTLA-4 contra los tumores pancreáticos Pan02
Fig. 2A: eficacia del anti-PD-1 y anti-CTLA-4 contra los tumores pancreáticos Pan02

Fig. 2B: eficacia del Anti-PD-1 y anti-CTLA-4 contra los tumores pancreáticos Pan02
Fig. 2B: eficacia del Anti-PD-1 y anti-CTLA-4 contra los tumores pancreáticos Pan02

Fig. 3: sobrevida de ratones con tumores pancreáticos Pan02 tratados con anti-PD-1 y anti-CTLA-4
Fig. 3: sobrevida de ratones con tumores pancreáticos Pan02 tratados con anti-PD-1 y anti-CTLA-4


Queríamos determinar si los inhibidores de puntos de control tuvieron un impacto en la infiltración de células inmunitarias en los tumores Pan02. En la figura 4, se muestran los perfiles inmunológicos de leucocitos CD45+, células T CD4+, células T CD8+, células T reguladoras (Treg), células supresoras derivadas mieloides de monocitos (M-MDSC) y MDSC de granulocitos (G-MDSC) totales.

Fig. 4: perfiles inmunológicos del tumor Pan02 en ratones tratados con anti-PD-1 y anti-CTLA-4
Fig. 4: perfiles inmunológicos del tumor Pan02 en ratones tratados con anti-PD-1 y anti-CTLA-4

 

SI bien hay una tendencia hacia una reducción de células T CD4+ en el grupo tratado con anti-CTLA-4 y una tendencia hacia una reducción de células T reguladoras en el grupo tratado con anti-PD-1 que se relacionan con el control de isotipo, no se observan otros cambios inmunológicos. Aunque los inhibidores de puntos de control por sí solos no tienen actividad aparente en el modelo Pan02, hay informes publicados sobre la actividad de inhibidores de puntos de control en tumores Pan02 con radiación3 o un anticuerpo agonista coestimulador anti-CD40,4 Es importante destacar que el anti-PD-L1 mostró una fuerte sinergia con el anti-CD40 y la radiación en esos estudios, lo que indica que, si bien los tumores Pan02 son resistentes a inhibidores de puntos de control de agente individual, la inhibición de puntos de control puede promover la actividad de agentes combinados.

 

Comuníquese con Covance para conversar con uno de nuestros científicos y descubrir cómo se puede usar el modelo Pan02 o uno de nuestros otros modelos singeneicos para su próximo estudio de inmuno-oncología.

1Corbett TH et al., Induction and Chemotherapeutic Response of Two Transplantable Ductal Adenocarcinomas of the Pancreas in C57BL/6 Mice. Cancer Res. 1984, Vol. 44: 717-726.

2Wang Y et al., Genomic Sequencing of Key Genes in Mouse Pancreatic Cancer Cells. 2012. Curr Mol Med. Vol. 12(3): 331–341.

3Azad A et al., PD-L1 blockade enhances response of pancreatic ductal adenocarcinoma to radiotherapy. 2017. EMBO Mol Med. Vol 9: 167–180.

4Luheshi NM et al., Transformation of the tumour microenvironment by a CD40 agonist antibody correlates with improved responses to PD-L1 blockade in a mouse orthotopic pancreatic tumour model. 2016. Oncotarget. Vol. 7(14): 18508-18520.

Nota: Los estudios se realizaron de conformidad con la normativa de bienestar animal vigente en un establecimiento con acreditación de AAALAC