ID8: un modelo singeneico en ratones para la evaluación de inmunoterapias para el cáncer de ovario

ID8-Luc es un nuevo modelo singeneico en ratones desarrollado para tratar cáncer de ovario ortotópico. El cáncer de ovario sigue siendo una necesidad médica no cubierta con una tasa de supervivencia relativa de 5 años del 17 % en pacientes diagnosticados con cáncer de ovario estadio IV altamente avanzado.

AUTOR:

Dylan Daniel, PhD, Director, Desarrollo Científico

FECHA:

Noviembre de 2017

El cáncer de ovario es una necesidad médica no cubierta y particularmente letal porque a menudo se detecta cuando la enfermedad ya está bastante avanzada. Se calcula que en 2017 unas 22.440 mujeres recibirán un diagnóstico de cáncer de ovario en Estados Unidos y habrá aproximadamente 14.080 muertes a causa de esta enfermedad. El tratamiento estándar en EE. UU. es la quimioterapia combinada con platino y taxano antimitótico, pero aunque estas opciones de tratamiento suelen ser eficaces al inicio, en general las pacientes sufren recaídas y la enfermedad sigue su curso. Necesitamos terapias nuevas para tratar el cáncer de ovario.

En base al éxito reciente de aprovechar el sistema inmunológico para tratar otros tipos de cáncer, los científicos dedicados al descubrimiento farmacológico están analizando la aplicación de métodos inmunoterapéuticos para tratar el cáncer de ovario. En este momento se están haciendo más de 50 ensayos clínicos para probar inmunoterapias y combinaciones en cáncer de ovario; sin embargo, hay una cantidad limitada de modelos de cáncer de ovario en ratones singeneicos disponibles para trabajar en farmacología preclínica. Covance desarrolló el modelo de línea celular de ratones singeneicos ID8 para probar tratamientos estándar y también para aplicaciones de inmuno-oncología. El ID8 proviene de células epiteliales de la superficie ovárica de ratones C57BL/6 que se transformaron mediante pasaje seriado in vitro.1 Se expresó luciferasa en las células ID8 (ID8-Luc-mCherry-Puro) para poder monitorear el crecimiento tumoral (intraperitoneal) ortotópico con imagenología por bioluminiscencia (BLI).

La cinética de crecimiento tumoral promedio (imagen 1A) y cinética de crecimiento individual (imagen 1B) del ID8-Luc-mCh-Puro se monitoreó con BLI como se muestra. La implantación de 1×107 células por ratón generó un crecimiento tumoral más consistente que la de 5×106 células por ratón en ratones albinos C57BL/6. Como era de esperar, la  señal (fotones/segundo) es mayor en los ratones albinos C57BL/6 (línea verde, imagen 1B, grupo 2) que en los ratones C57BL/6 de tipo silvestre (línea roja, imagen 1B) por la falta de melanina en su piel que absorbe la luz generada por las células tumorales. En la imagen 1C se muestran imágenes de BLI representativas de la evolución de la enfermedad ortotópica en el ID8-Luc-mCh-Puro.

Imagen 1A: crecimiento intraperitoneal del cáncer de ovario ID8-luc-mCh-puro monitoreado por BLI de cuerpo entero.
Imagen 1A: crecimiento intraperitoneal del cáncer de ovario ID8-luc-mCh-puro monitoreado por BLI de cuerpo entero.

Imagen 1B: cinética de crecimiento del tumor-ID8-Luc-mCh-Puro
Imagen 1B: cinética de crecimiento del tumor-ID8-Luc-mCh-Puro

Imagen 1C: imágenes de BLI representantivas de la evolución de cáncer de ovario ID8-luc-mCh-Puro en ratones albinos C57BL/6 (1×107 células/ratón).
Imagen 1C: imágenes de BLI representantivas de la evolución de cáncer de ovario ID8-luc-mCh-Puro en ratones albinos C57BL/6 (1×107 células/ratón).

Los ratones implantados con células ID8-Luc-mCh-Puro subieron de peso durante todo el estudio (imagen 2) y algunos ratones exhibieron pérdida de peso solo al final del estudio. La evolución de la enfermedad, que se manifiesta como distensión abdominal por la formación de ascitis (imagen 3), es lineal con una supervivencia de 35-40 días en el ratón albino C57BL/6 implantado con 1×107 células.


Imagen 2: cambio en peso corporal en modelo ID8-Luc-MCh-Puro: cambio promedio en peso corporal por grupo con error estándar.
Imagen 2: cambio en peso corporal en modelo ID8-Luc-MCh-Puro: cambio promedio en peso corporal por grupo con error estándar.

Imagen 3: cinética de supervivencia de ratones con cáncer de ovario ID8-luc-mCh-Puro ortotópico.
Imagen 3: cinética de supervivencia de ratones con cáncer de ovario ID8-luc-mCh-Puro ortotópico.

Covance realizó un perfil inmunológico de la ascitis a partir de los ratones con ID8-Luc-mCh-Puro. En la tabla 1 se muestran los perfiles inmunológicos para el total de leucocitos CD45+, células T CD4+, células T CD8+, Tregs, CSDM-M, CSDM-G, MAT M1 y MAT M2. Si bien hay una heterogeneidad considerable en el perfil inmunológico entre ratones, todos los ratones tienen una robusta infiltración de células T CD8+ con proporciones de células T CD8+/Treg favorables. Se ha reportado que el modelo de cáncer de ovario ID8 responde a la inmunoterapia IL-12, lo que combinado con la proporción de células T CD8+/Treg favorable, sugiere que el modelo sería útil para probar nuevas inmunoterapias.2 En este momento se están desarrollando estudios para analizar la respuesta a inmunoterapias y tratamientos estándar.

Tabla 1: perfiles por citometría de flujo de subgrupos de células inmunes en ascitis de ratones individuales a partir de ratones con cáncer de ovario ID8-Luc-mCh-Puro
Tabla 1: perfiles por citometría de flujo de subgrupos de células inmunes en ascitis de ratones individuales a partir de ratones con cáncer de ovario ID8-Luc-mCh-Puro

 

*Proporción de CD8/Treg determinado según los recuentos absolutos de los gates CD8 y Treg individuales.
nd = no determinado

Comuníquese con Covance para hablar con uno de nuestros científicos y averiguar cómo se puede usar el ID8 o uno de nuestros otros modelos singeneicos para su próximo estudio de inmuno-oncología.

ARTÍCULO DESTACADO SOBRE MODELO | ID8: modelo singeneico de cáncer de ovario con respuesta a inhibidores de control del sistema inmunológico (versión en PDF)


Descargar

1Robey KF et al., "Development of a syngeneic mouse model for events related to ovarian cancer". Carcinogenesis. 2000, Vol. 21: 585-591.

2Janat-Amsbury MM et al, "Combination of Local, Non-viral IL12 Gene Therapy and Systemic Paclitaxel Chemotherapy in a Syngeneic ID8 Mouse Model for Human Ovarian Cancer". Anticancer Research. 2006, Vol. 26: 3223-3228.

Nota: Los estudios se realizaron de conformidad con la normativa de bienestar animal vigente en un establecimiento con acreditación de AAALAC