Análisis de expresión proteica

ELISA
Curva estándar de IL-6 humana

 

Tenemos un lector de placas Synergy 2 con un PMT con corrimiento al rojo, un lector de placas Cytation 3 con monocromadores que puede medir una amplia variedad de longitudes de onda, y un lavador de microplacas 405LS para reducir el lavado incompleto o irregular. Tenemos amplia experiencia usando técnicas ELISA de varios proveedores y con varios tipos de muestras como células cultivadas, sangre entera, tejidos frescos y tejidos congelados. Los kits ELISA basados en absorbancia o basados en fluorescencia se pueden usar para producir una curva estándar y medir con exactitud la cantidad de una proteína específica en sus muestras. Para obtener los resultados más precisos, sistemáticamente generamos curvas estándar a partir de estándares proteicos en duplicados o triplicados y cuantificamos su proteína de interés en cada muestra a partir de pocillos triplicados.

ELISpot / FluoroSpot
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Ahora nuestros servicios in vitro ofrecen el ensayo tipo sándwich​​​​​​​ InmnoSpot vinculado a enzimas (ELISpot o FluoroSpot) para medir la frecuencia de secreción celular de citocinas en suspensiones celulares.  Este ensayo permite fijar la citocina secretada al anticuerpo recubierto, lo que resulta en una sola mancha. El analizador universal CTL de S6 se usa para capturar imágenes de calidad y analizar las manchas.  Equipado con cuatro filtros ópticos, el analizador CTL puede detectar hasta tres analitos de manera simultánea, ya sea con lecturas colorimétricas o fluorométricas.  Los kits ELISpot o FluoroSpot son compatibles con muestras de sangre, linfoides y de tejido sólido.  Las muestras se toman de manera rutinaria por duplicado o triplicado para obtener un promedio que permita cuantificar la cantidad de manchas en cada muestra.

Western blot
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En colaboración con nuestros clientes hemos realizado muchos Western blots exitosos contra una gran cantidad objetivos relevantes para oncología. El personal cuenta con amplia experiencia haciendo Western blots a partir de varios tipos de muestras como células cultivadas, tejidos frescos y tejidos congelados. Con el sistema de imagenología Typhoon, se pueden detectar anticuerpos secundarios quimioluminiscentes, quimiofluorescentes y fluorescentes, lo que permite la identificación de varias proteínas de interés a la vez. También tenemos la capacidad de cuantificar las bandas en una membrana con el software ImageQuant para determinar el tamaño e intensidad relativa de cada banda para cada muestra.

Citometría de flujo
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Tenemos dos citómetros de flujo Attune NxT con cuatro láseres capaces de detectar compuestos fluorescentes en 14 canales. Ya sea que necesite examinar la abundancia de una proteína específica o varias proteínas en la superficie o dentro de las células, nuestros expertos en citometría de flujo junto con el Attune NxT pueden hacerlo posible. Monitoree la abundancia o localización hacia/desde la membrana plasmática de una proteína específica durante un período con tratamiento o compare los niveles de una proteína en distintas líneas celulares o cepas de ratones. Combine la detección de una proteína específica con cualquiera de nuestros otros ensayos de proceso celular con citometría de flujo, (abajo) como el ensayo de apoptosis, ciclo celular o viabilidad celular para determinar si la abundancia de la proteína cambia en distintas etapas de un proceso celular. Hemos detectado con éxito cientos de proteínas diferentes en muestras como células cultivadas, sangre, tejidos y órganos. En sangre, hemos detectado con éxito proteínas usando un ensayo sin lavado y sin lisado que reduce la cantidad de manipulación y permite el análisis de volúmenes muy pequeños de sangre. Vea más información sobre nuestros servicios de citometría de flujo.

Matriz citométrica de microesferas
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También tenemos un sistema Luminex® 100™. Este sistema es un analizador flexible basado en los principios de la citometría de flujo. El sistema le permite multiplexar (medir simultáneamente) hasta 100 analitos en un mismo pocillo de microplaca, usando muestras de tamaño muy pequeño. El sistema genera resultados de bioensayos rápidos y rentables en muchos formatos de ensayo, incluso ensayos de ácido nucleico, ensayos de receptor-ligando, inmunoensayos y ensayos encimáticos. Tenemos placas comerciales, prefabricadas y multiplexadas disponibles para medir los componentes de vías de señalización celular completas o citocinas como la vía AKT, apoptosis, quimiocinas, citocinas, citocinas inflamatorias, factores de crecimiento y las vías TH1/TH2.

Inmunohistoquímica
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Analice sus muestras de tejidos con tinción IHC para detectar células anormales como aquellas que se encuentran en los tumores cancerosos. Hay marcadores moleculares específicos que son característicos de eventos celulares particulares como proliferación o muerte celular (apoptosis). La IHC también se usa muchísimo en investigación básica para comprender la distribución y localización de biomarcadores y proteínas diferencialmente expresadas en diferentes partes de un tejido biológico. Ofrecemos una completa variedad de servicios de histología e IHC internos, con proyectos a medida, y todo el tiempo estamos agregando nuevos marcadores. Nuestros servicios incluyen:

  • Paneles: cáncer, inmuno-oncología
  • Tejido normal, tumor, xenoinjertos, línea celular, validación, inmunofluorescencia, inmunocitoquímica, Multiplex

Inmunohistoquímica y marcadores validados

Microscopía de fluorescencia
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Tenemos un microscopio de fluorescencia invertido Olympus CKX53F para ver proteínas/compuestos fluorescentes en células vivas y un lector de imágenes multimodal BioTek Cytation 3 para ver proteínas/compuestos fluorescentes en células vivas o fijas. Con el uso de microscopía de fluorescencia en células vivas podemos determinar rápidamente el porcentaje de células que contienen un compuesto o proteína fluorescente sin manipular las células. Con células fijas, podemos determinar la localización celular de proteínas específicas dentro de las células después de teñirlas con anticuerpos con etiquetado fluorescente y usando tintes fluorescentes como DAPI, FM 1-43, calceína o DiOC6 para definir compartimentos específicos dentro de una célula.